細(xì)胞培養(yǎng)液選配關(guān)注點(diǎn)
培養(yǎng)液是人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長(zhǎng)的生存環(huán)境，對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)起著關(guān)鍵性作用。
1. 選擇培養(yǎng)基沒(méi)有一定的標(biāo)準(zhǔn)，某種培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞，某種細(xì)胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長(zhǎng)。但是，建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)選的培養(yǎng)基。可以查閱參考文獻(xiàn)，或在購(gòu)買細(xì)胞株時(shí)咨詢。
2. 1640的確是非常便宜的培養(yǎng)基，也很好用。但是，它的緩沖力*弱，所以有時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)有影響，尤其是一些實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期傳代狀態(tài)不好的細(xì)胞。有條件還是用DMEM培養(yǎng)基。
3. 一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和***時(shí)，放入4度冰箱。應(yīng)該在2到3周內(nèi)用完它。因?yàn)椋恍?**和血清中的基本成分在解凍后就開(kāi)始降解。2-3周后就降解完了。
4. 培養(yǎng)基的pH值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈拋物線增長(zhǎng)，當(dāng)碳酸氫鈉加到一定量時(shí)，pH變化越來(lái)越小。而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈直線增長(zhǎng)，碳酸氫鈉量越大，滲培養(yǎng)基變成了高滲溶液，細(xì)胞會(huì)脫水萎縮滴。 （ATCC 推薦大部分細(xì)胞添加碳酸氫鈉為1.5g/L）
5. 胎牛 血清必須貯存于–20 ～ -70℃，若存放于4℃，2～3周就降解了。可將1瓶500ml的血清，每次40～45 ml 分裝于無(wú)菌50 ml 離心管中。
6. 血清的解凍和細(xì)胞的解凍正相反：細(xì)胞是越快越好；血清是越慢越好。血清解凍步驟: -20℃或–70℃冰箱拿出來(lái)，放到4℃冰箱，放**，慢慢融化。
7. 進(jìn)口的胎牛血清，一般不需要熱滅活，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物顯著增多，且會(huì)影響血清的品質(zhì)。這些沉淀物在顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常誤以為是血清遭受污染。
